功能蛋白大肠杆菌可溶高表达技术

成果介绍

大肠杆菌是目前使用最为广泛,最为便利的重组蛋白表达宿主,具有工艺简单,成本低廉和易于放大生产等诸多优点。然而,在利用大肠杆菌系统表达与生产医药健康相关蛋白时,往往存在重组蛋白包涵体、活性低,表达量低等问题。

课题组通过对大肠杆菌基因组进行深入挖掘分析,分型,改造,辅以表达载体元件创造性设计及培养条件优化,开发建立一种功能蛋白大肠杆菌高效可溶表达系统。该方法已经成功实现正常表达为包涵体、表达量低(可溶性)的 4 大类 20 多种蛋白的可溶性高效表达,具体如下:

一是重组蛋白药物。利用该技术已成功实现正常表达为包涵体的神经生长因子、人白介素 15、人白介素 18、人干扰素 a2b 等多种细胞因子的可溶性高表达。与现有哺乳动物细胞表达系统相比,简化工艺、极大降低成本。

二是药物靶点/疾病检测试剂盒核心原料。利用该技术已成功实现正常无法表达/表达量低的人内质网膜蛋白,拟南芥外膜蛋白,霉菌内膜蛋白,非洲猪瘟外壳蛋白等蛋白的可溶性高表达。

三是含特殊结构域蛋白与工具酶。利用该技术已实现正常表达为包涵体的含有特殊结构域蛋白,如含有 FAD、NAD(P)H、HEME、细胞色素 C等结构域的可溶性高表达,以及常见分子生物学工具酶的可溶性高效表达。

功能蛋白大肠杆菌可溶高表达技术的建立,对于低成本,规模化制备高活性的功能蛋白具有非常重要的意义。

所属产业
海洋生物制药
所有权人/单位
自然资源部第三海洋研究所
联系人
胡凡
联系方式(电话)
18150019696;17350754772
联系方式(邮箱)
fhu@tio.org.cn

成果流程

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